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细胞膜红色荧光探针DiI图片
产品货号:
QN2871
中文名称:
细胞膜红色荧光探针DiI
英文名称:
1,1-Dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindocarbocyanine iodide
产品规格:
10mg
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
DiI即DiIC18(3),全称为1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindocarbocyanine perchlorate,是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。

别名:DiI荧光染料
分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.88
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年

DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光,DiI和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱。其中,最大激发波长为549nm,最大发射波长为565nm。

DiI可以溶解于无水乙醇、DMSO和DMF,溶解度约为1-2.5mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。

DiI被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-termtracer)。DiI通常不会影响细胞的生存力(viability)。被DiI标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达4周,在体内可以长达一年。DiI在经过固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6mm/day,在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为6mm/day。

DiI除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
用于细胞膜荧光标记时,DiI的常用浓度为1-25μM,最常用的浓度为5-10μM。DiI可以直接染色活的细胞或组织,染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。

使用说明:
1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备
(1)配置DMSO或EtOH储存液:储存液用DMSO或EtOH配置浓度1~5mM。
(2)注意:未使用的储存液保存在-20℃,避免反复冻融。(3)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5µM的工作液。 注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2.悬浮细胞染色
(1)悬浮细胞密度为1 × 106/mL加入到工作液中。
(2)在37℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。
(4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。
(5)重复(3),(4)步骤两次以上。
3.粘壁细胞的染色
(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)在盖玻片的一角加入100µL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)在37℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
4.显微镜检测
(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
(2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:a)DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;b)DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;c)DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005 5.流式细胞仪的检测  DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。
相关搜索:细胞膜红色荧光探针DiIDiI荧光染料
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